Cat. No. PRHYPE-XS
主要特征
噬菌體展示輔助噬菌體
用于分離重組抗體、蛋白質(zhì)和肽的工具
提高平移效率
用減少的淘洗抗原淘洗
高親和力和低親和力粘合劑的鑒定
數(shù)量1x2 ml(lyoph)
凈化PEG沉淀
儲(chǔ)存2-8°C
預(yù)期用途僅研究用途
重構(gòu)用2ml H2O溶液重構(gòu)每個(gè)小瓶。
應(yīng)用在包裝普通噬菌體展示噬菌體粒(例如pSEX、pHen2)中提供輔助噬菌體功能
細(xì)菌通過(guò)pIII的特異性感染
工作稀釋度標(biāo)簽上顯示了重組后每毫升超噬顆粒的濃度。對(duì)于感染,使用20的MOI
穩(wěn)定性重建后立即使用
同義詞噬菌體
從噬菌體包裝文庫(kù)中分離重組抗體、蛋白質(zhì)或肽的有效工具。
優(yōu)勢(shì)
提高平移效率
允許用減少的淘洗抗原量淘洗
識(shí)別高親和力和低親和力粘合劑
介紹
Rondot等人開(kāi)發(fā)了輔助噬菌體技術(shù)(“噬菌體系統(tǒng)")(Nature Biotechnology 19:75-812001)。噬菌體系統(tǒng)允許通過(guò)增加每個(gè)噬菌體顆粒顯示的抗體數(shù)量(高達(dá)5對(duì)0.01)來(lái)改善噬菌體展示中的抗體呈現(xiàn),因此該系統(tǒng)在功能基因分析和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域提供了巨大優(yōu)勢(shì)。噬菌體的淘選可以用少量抗原和更高的效率進(jìn)行。例如,通過(guò)在二維凝膠電泳后在蛋白質(zhì)斑點(diǎn)的印跡上使用超噬菌體填充文庫(kù)的淘選,可以改進(jìn)用于抗體分離的通用文庫(kù)的應(yīng)用。
更多應(yīng)用程序
大量開(kāi)放閱讀框(ORF)可以通過(guò)對(duì)合成的膜結(jié)合肽表位進(jìn)行篩選來(lái)分析。在癌癥研究中,超噬菌體堆積的文庫(kù)可以通過(guò)對(duì)細(xì)胞表面進(jìn)行篩選來(lái)發(fā)現(xiàn)新的腫瘤標(biāo)記物。
噬菌體系統(tǒng)
噬菌體攜帶pIII基因缺失。它們由產(chǎn)生功能性pIII的大腸桿菌包裝細(xì)胞系產(chǎn)生,用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。由此產(chǎn)生的超噬菌體表面攜帶功能性pIII,但基因組中缺乏pIII基因。然后這些超噬菌體可以被用來(lái)用噬菌體文庫(kù)感染細(xì)菌。每個(gè)產(chǎn)生的展示噬菌體在其表面攜帶抗體或肽的若干拷貝,從而顯著提高了篩選效率。
pSEX噬菌體抗體基因文庫(kù)示例
通過(guò)使用超噬菌體,抗原結(jié)合增強(qiáng)了兩個(gè)數(shù)量級(jí)以上。此外,由于攜帶抗體的質(zhì)粒(噬菌體粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點(diǎn),因此可以通過(guò)蛋白酶處理洗脫超噬菌體填充的文庫(kù),從而洗脫最高親和力的結(jié)合物,再加上恢復(fù)野生型感染性表型,以優(yōu)化目標(biāo)抗體基因的回收。
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