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上海起發(fā)氯甲基酮現(xiàn)貨
Chloromethylketones
生物素化的氯
甲基酮的結構顯示了生物素化的FPR氯甲基酮(BFPRCK)(TOP)和生物素化的EGR氯甲基酮(BEGRCK)(BOTTOM)的結構。SPACER代表一個碳間隔基,用于在探針與絲氨酸蛋白酶的活性位點反應后優(yōu)化生物素基團的反應性。
HTI FFPRCK-06 熒光素 FPR-氯甲基酮
尺寸 | 1毫克 |
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公式 | 二甲基亞砜 |
分子量 | 846 |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | HPLC和TLC分析 |
復合 | FFPR-CK.1HCl |
含量測定 | |
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保質期(正確存放) | 12個月 |
化學式 | C 42 H 42 O 9 N 6 Cl 2 |
三肽氯甲基酮已被廣泛用于不可逆地抑制各種絲氨酸蛋白酶(1-5)。常見的氯甲基酮是快速凝血酶抑制劑FPRCK(Phe-Pro-Arg-氯甲基酮;通常稱為PPACK)和EGRCK(Glu-Gly-Arg-氯甲基酮;通常稱為GGACK)??焖賆a因子抑制劑(1)。FPRCK和EGRCK在蛋白質分離過程中被廣泛使用,以抑制絲氨酸蛋白酶活性并防止酶原進一步轉化為活性酶。近,用報告基團修飾這些三肽氯甲基酮,例如熒光探針(6-8,14),放射性標記(9)或硫代反應標記(10),為研究各種絲氨酸提供了*的方法。蛋白酶。
生物素作為報告組的使用已廣泛用于抗體(基于ELISA的測定)和蛋白質印跡中。生物素與抗生物素蛋白一起,創(chuàng)造了一種高靈敏度的方法來檢測抗體,從而檢測抗原。通過用生物素基團修飾三肽-氯甲基酮,抗生物素蛋白/生物素系統(tǒng)的靈敏度可以擴展到研究絲氨酸蛋白酶,而無需針對活性酶的特異性抗體。
生物素化的三肽氯甲基酮可以多種方式使用(11-13)。首先,化合物可以與樣品或制備物中不需要的絲氨酸蛋白酶反應,然后可以使用抗生物素蛋白-瓊脂糖(11)與蛋白酶一起去除。其次,生物素化的絲氨酸蛋白酶可以在不使用特異性抗體的情況下在印跡上觀察到(11)。第三,可以在活性位點特異性免疫分析(12、13、15),例如tPA-CASSIA中對生物素化的絲氨酸蛋白酶進行定量(見分析試劑盒)。這些化合物上使用的間隔基已經過優(yōu)化,可以使上述步驟中的生物素化FPRCK和生物素化EGRCK具有良好的反應性。
除了生物素化的氯甲基酮,還可以使用熒光素標記的化合物。熒光素標記的化合物可用于蛋白質印跡和熒光成像應用。
生物素化的和熒光素標記的FPRCK和EGRCK通過Williams等人的方法制備。(11)。
特殊性質 | 三肽氯甲基酮(CMK)是非常有效且不可逆的絲氨酸蛋白酶抑制劑。BFPRCK對于抑制凝血酶和tPA特別有用,而BEGRCK對抑制Xa因子有用。生物素部分提供了使用肽-CMKs作為特異性探針通過親和素/生物素相互作用檢測和/或捕獲絲氨酸蛋白酶的能力。 |
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特別說明 | FPRCK和EGRCK凍干提供,應在4oC下保存。生物素化的CMK以10 mM HCl的形式提供,應在-20oC或更低溫度下冷凍保存。熒光素CMK以DMSO的形式提供,還應在-20oC或更低的溫度下存儲。 |
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